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2023-919
你知道原代培養和傳代培養主要區別是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、原代培養原代培養即第一次培養，是指將培養物放置在體外生長環境中持續培養，中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義：1.養物一經接種到培養器皿（瓶）中就不再分割，任其生長繁殖；2.原代培養中的“代”并非細胞的“代”數，因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞；3.原代培養過程中不分割培養物不等于不更換培養液，也不等于不更換培養器皿。正常細胞培養的世代數有限，只有癌細胞和發生轉化的細胞才能無限生長下去。所謂轉...
查看更多2023-919
細胞分離是將混合細胞群體中的目標細胞分離出來的過程，常用于細胞治療產品工藝流程中。那么你知道細胞分離技術和策略是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、離心法：差速離心：通過控制離心速度和時間，利用細胞的不同沉降速度分離出不同細胞類型。密度梯度離心：使用密度梯度介質（如離心膜過濾器或離心管）來實現細胞的分層和分離，根據細胞密度的差異進行分離。二、流式細胞術：免疫細胞分選法：利用細胞表面標記物和特定的熒光標記物，通過細胞與熒光抗體的結合來實現細胞的分選和分離。磁珠分離法：通過將特定靶向...
查看更多2023-918
RNA是目前發現細胞內生物功能zui豐富多樣的生物大分子，同時是DNA與蛋白質信息傳遞的橋梁，因此完整RNA的提取和純化是功能基因組時代的重要手段。那么你知道RNA提取的關鍵點在哪嗎？讓我們一起來看看吧！所有RNA的提取過程中都有五個關鍵：①樣品細胞或組織的有效破碎；②有效地使核蛋白復合體變性解離，釋放出RNA；③對RNA酶的有效抑制；④有效地將RNA從DNA和蛋白質混合物中分離；⑤對于多糖含量高的樣品還要采取措施有效去除多糖雜質。但其中最關鍵的是抑制RNA酶的活性。RNA酶...
查看更多2023-918
不同組織RNA提取原理是將細胞裂解，釋放出RNA，并通過不同方式去除蛋白，DNA等雜質，最終獲得高純度RNA產物的過程。常用的RNA提取方法是Trizol方法，Trizol內含異硫氰酸胍能迅速破碎細胞，同時使核蛋白復合體中的蛋白變性并釋放出核酸，由于釋放出的DNA和RNA在特定pH值下的溶解度不同，且分別位于中間相和水相，從而使DNA和RNA得到分離，取出水相后，通過有機溶劑(氯仿)抽提及異丙醇沉淀，可得到純凈RNA。那么你知道RNA提取的原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一...
查看更多2023-915
病毒轉染是指將外源病毒導入真核細胞的技術，用病毒將帶有目的基因的載體整合到細胞的基因組中，以達到長期穩定表達目的基因的目的，那么你知道該如何解決病毒轉染實驗的常見問題嗎？讓我們一起來看看吧！一、轉染效率低可能是由于病毒感染的細胞數量不足、濃度太低、轉染時間過短、細胞質量差等原因導致。可以嘗試增加病毒的濃度和轉染時間，或者優化細胞培養條件來提高轉染效率。解決方法：優化病毒載體和轉染劑的選擇和使用方法，調整細胞的培養條件和密度，增加轉染時間和濃度等操作方案。二、細胞毒性病毒轉染過...
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